产品货号：
SNM185
中文名称：
全血乳酸测定试剂盒(比色法)
英文名称：
Lactic Acid assay kit
产品规格：
50管/48样
发货周期：
1～3天
产品价格：
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以NAD+为氢受体，LDH催化乳酸脱氢产生丙酮酸，使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
- 快速简便：全程约30分钟，可测48例左右样本。
- 取样量微：本法取样量50～100μL即可
- 稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
- 再现性好：变异系数CV=1.7%。
- 回收试验：X =99%。
- 受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
| 组分 | 规格 | 说明 |
| 蛋白沉淀剂 | 50mL | 室温保存6个月，如有结晶，则取上清进行实验。 |
| 试剂一：酶稀释液 | 60mL | 4～8℃保存6个月。 |
| 试剂二：酶贮备液 | 0.6mL | 4～8℃保存6个月；用时用一次性吸头进行取样。 |
| 试剂三：显色溶液 | 2×6mL | 4℃～8℃避光保存6个月。 |
| 试剂四：粉剂 | 2支 | 短期内使用可放4～8℃，长期(6个月)请置-20℃。 |
| 试剂五：终止液 | 2×60mL | 4～8℃保存6个月。 |
| 试剂六：3mmol/L标准液 | 2mL | 4～8℃保存6个月。 |
- 分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为530nm）
- 恒温水浴箱或气浴箱（孵育温度为37℃）
- 台式离心机
- 漩涡混匀器
- 微量移液器
- 酶工作液的配制：
临用前将试剂二（酶贮备液）和试剂一（酶稀释液）按照1︰100的体积比进行混合，现用现配，4℃保存24小时内有效。 - 显色剂的配制：
使用前取试剂四(粉剂)1支倒入1瓶试剂三(显色溶液)中，待粉剂全部溶解后，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3次，使二者充分混合，配成显色剂，4～8℃避光保存。
- 前处理：
上清液制备：取待测样本0.1mL，加入蛋白沉淀剂0.6mL混匀，3500～4000转/分，离心10分钟，取上清液进行测定。- 全血及时用蛋白沉淀剂制备成乳酸上清液。
- 制成的乳酸上清冰箱4℃或者0℃以下保存，15～30天稳定不变。
- 如果您的血样很少，您可以取0.05mL全血加0.3mL蛋白沉淀剂。
- 全血及时用蛋白沉淀剂制备成乳酸上清液。
- 操作表：
空白管 标准管 测定管 双蒸水（mL） 0.02 3mmol/L标准液（mL） 0.02 上清液（mL） 0.02 酶工作液（mL） 1 1 1 显色剂（mL） 0.2 0.2 0.2 混匀，37℃水浴准确反应10分钟 终止液（mL） 2 2 2 混匀，530nm，1㎝光径，双蒸水调零，测各管吸光度。
- 计算公式：
全血中乳酸含量
(mmol/L)＝ 测定OD值－空白OD值 × 标准浓度
(3mmol/L)× 样本前处理*
稀释倍数(7倍)标准OD值－空白OD值
注*：0.1mL全血加0.6mL蛋白沉淀剂，或者取0.05mL全血加0.3mL蛋白沉淀剂，所以稀释7倍。 - 计算举例：
例1：取小鼠新鲜的抗凝全血0.1mL加0.6mL的蛋白沉淀剂进行样本前处理，取上清20μL进行乳酸测定，测得空白管吸光度为0.076，标准管吸光度为0.384，测定管吸光度为0.280。则计算结果为：全血中乳酸含量
(mmol/L)＝ 2.280－0.076 ×3×7＝13.909mmol/L 0.384－0.076
- 应取空腹或静止状态下的静脉血，并避免血液淤滞，如用止血带，应在针头刺入静脉后马上放开，然后等2分钟后再抽血。
- 血液要新鲜，最好是当天完成，如果当天完不成，可将样本进行样本前处理后，将上清液4℃或-20℃保存可稳定15～30天。
- 蛋白沉淀剂如有结晶，则取上清进行实验。
- 在批量实验前需要进行预实验，以确定测定绝对OD（测定OD-空白OD）在0.05～0.35之间。如果测定绝对OD小于0.05，则需要加大样本浓度重新测定；如果测定绝对OD大于0.35，则需要将样本稀释后重新测定。
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